仙一网 - 文献资料 - 医学书籍 - 细胞和分子免疫学

  二、肿瘤浸润淋巴细胞

  1986年Rosenberg研究组首先报道了肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)。TIL细胞表型具有异质性,一般来说,TIL中绝大多数细胞CD3阳性。不同肿瘤来源的TIL细胞中,CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例有差异,大多数情况下以CD8+T细胞为主。新鲜分离的TIL中CD25+细胞百分率较低,随着体外加IL-2培养时间的延长,CD25+细胞百分率逐渐升高。NK细胞的标记(CD16,CD56)在TIL体外加IL-2培养过程中有先增高后降低的趋势。

  用机械处理和酶消化方法,从肿瘤局部分离出肿瘤浸润的淋巴细胞,加入高剂量IL-2体外培养,残存的肿瘤细胞7-13天全部死亡。经IL-2活化的TIL与来自PBMC的LAK细胞比较,其特点是:(1)50-100倍,因此在治疗中可以减少效应细胞和IL-2的用量,而且对LAK治疗无效的晚期肿瘤仍有一定治疗效果;(2)主要由CD8阳性细胞诱导而来,在动物实验中发现TIL杀伤肿瘤作用具有特异性;(3)宿主的抑制状态有利于TIL的杀伤作用,因此治疗时加用环磷酰胺(Cy)100mg/kg可明显提高疗效,可能与免疫抑制药能消除抑制性细胞或因子,增强过继免疫治疗作用有关,因而可减少IL-2的用量,降低毒副反应;(4)可从手术切下肿瘤组织、肿瘤引流淋巴结、癌性胸腹水中获得淋巴细胞,经加IL-2培养后,其生长、扩增能力强于LAK细胞。已有报道应用TIL治疗14例转移性肺癌等晚期肿患者,其中4例肿瘤缩小50%以上,副作用明显低于IL-2/LAK疗法。

  应用LAK或TIL细胞治疗肿瘤国内外进展都很快,今后发展的方向是:(1)提高LAK细胞的纯度,应用活化LAK细胞贴壁的特性,纯化粘附LAK(adherent-LAK,A-LAK)细胞。在IL-2诱导下数量可增加100倍,而且抗肿瘤转移的作用比LAK强20-50倍。(2)改变继承转移细胞在体内的分布,如改变注射细胞途径和方法,达到局部/区域继承免疫疗法的目的。(3)与其它细胞因子如IL-12、IFN、TNF-α和CSF联合治疗,增强LAK的杀伤活性,另有报道,抗CD3单抗与IL-2协同,能显著提高LAK细胞的数量和杀伤活性。应用CD3单抗诱导的杀伤细胞称为CD3抗体激活的杀伤细胞(CD3McAb activated killer cells,CD3AK),抗体含量在10-20ng/ml即可达到刺激杀伤活性的高峰,体外培养数天后即可出现明显的杀伤活性。CD3AK激活需要单核细胞存在,其增殖速度和细胞毒活性均高于LAK。所有的D3+CD8+T细胞和1-6%CD3+CD4+T细胞可诱导出CD3AK。CD3AK已开支应用于临床。(4)将某些细胞因子(如IL-2、TNF等)cDNA转染LAK或TIL用于基因治疗。

表7-14 影响LAK效应的因素及机理

影响因素 调节方式 效  应
促进作用 抑制作用
细胞 单核-巨噬细胞 双向 T、NK产生IL-2,表达高亲和性IL-2r 产生PGE2,抑制IL-2产生,消炎痛(indomethacin)可解除Mφ抑制作用
肿瘤细胞 双向 肿瘤细胞及其提取物增强混合淋巴细胞肿瘤细胞培养和体外致敏的LAK活性 肿瘤细胞分泌的因子抑制LAK活性
中性粒细胞 产生超氧化阴离子(O2-)
红细胞

 

 

 

 

分泌超氧化物歧化酶,抑制O2-作用,促进淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ和表达IL-2R  
细胞因子 IL-1 IL-2、IFN-γ产生和IL-2R表达,增强LAK的ADCC效应  
IL-3 +  
IL-4 双向 +,多为小鼠实验系统 -,抑制IL-2诱导的LAK活性
IL-5 协同IL-2诱导LAK活性  
IL-6 协同IL-2诱导LAK活性  
IL-7 单独可诱导LAK活性  
IL-12 协同IL-2诱导LAK活性  
GM-CSF 促进Mφ分泌IL-1、TNF-α  
TNF-α 与IL-2有协同作用,LAK分泌  
    TNF-α直接作用  
IFN-γ 双向 促进LAK分化 可通过单核-巨噬细胞分泌PGE2抑制LAK活性
IFN-β 抑制细胞因子产生和受体 抑制细胞因子产生和受体表达
LR 促进LAK杀伤活性  
抗体 抗肿瘤细胞 促进LAK的ADCC  
抗CD3 与IL-2联合应用,促进LAK活性,增加LAK数量  
抗Tac,抗TfR   封闭细胞表面结构
抗IFA-1   抑制效应细胞-靶细胞粘附
抗LAK-1    
双特异性抗体 抗肿瘤和CD3McAb重构的双特异性抗体  
多糖激素神经肽 蘑菇多糖、黄芪    
去甲肾上腺素 激活PKC  
生长抑素 抑制腺苷酸环化酶  
糖皮质激素   -
PGE2    
β-内啡肽    
环孢菌素A   -

表7-15 生药活性多糖对细胞因子产生、淋巴细胞功能和抗肿瘤的增强作用

名称 调节作用 应用范围
香菇多糖

(Lentinan)

促进IL-1、IL-2产生 免疫增强剂抗肿瘤 
提高Th功能  
促进T细胞分化和CTL杀伤活性  
协同IL-2激活的LAK杀伤活性  
协同IL-2激活的LAK杀伤活性  
枸杞子多糖

(Kycium Bsrbarum polysaccharide,LBS)

促进IL-2分泌 调节免疫功能
  抗衰老

抗肿瘤(动物实验)

刺五加多糖

(polysaccharide of Acanthopanax Senlicosus,PAS)

 

 

促进淋巴细胞对丝裂原的 抗癌、抗白血病
增殖反应

协同ConA诱导淋巴细胞分泌

IL-2

诱生IFN

促进CTL活性

(动物实验)

 

 

黄芪多糖

(Astragalus polysaccharide,APS)

促进淋巴细胞增殖 治疗化疗引起
增强Th功能 的免疫抑制
增强病毒诱生IFN  
促进IL-1、IL-2产生  
F3成份增强LAK活性